動物源性DNA檢測試劑盒是為專業(yè)的高通量實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的，但是現(xiàn)在這種試劑盒是適合中低等通量的實(shí)驗(yàn)室使用，這個(gè)試劑盒專門為每天需要制備的樣品量達(dá)到100個(gè)的實(shí)驗(yàn)室而設(shè)計(jì)。
該試劑盒在連接探針末段引入不同長度的標(biāo)簽序列，獲得長度各異的目的探針連接產(chǎn)物，利用熒光標(biāo)記的通用引物對連接產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，通過熒光毛細(xì)管電泳對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳分離檢測，后通過對電泳圖譜的分析獲取各個(gè)位點(diǎn)的峰高，進(jìn)而對樣品目的區(qū)域的拷貝數(shù)進(jìn)行分析。
建議使用試劑配套動物基因組DNA提取系列產(chǎn)品，具體過程詳見產(chǎn)品說明書。剪下所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液的PCR管，放置在室溫待解凍后，離心30秒后揭開封口膜，向每管反應(yīng)液中分別加入5μL模板，順序?yàn)镹G、待測樣品模板。蓋好配套的PCR管蓋后，渦旋混勻30秒，離心1分鐘，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
1、需要按試劑準(zhǔn)備中描述的方法，配制好動物源性DNA檢測試劑盒各種組分的工作液。
2、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫，標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔。
3、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
4、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL，樣本孔加待測樣本50μL，空白孔不加。
5、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60分鐘。
6、除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，加入過氧化物酶標(biāo)記的檢測抗體100μL。
7、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置20s，甩去洗滌液，吸水紙上拍干。
8、將底物A和B按1:1體積充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL，用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15分鐘；
9、如此重復(fù)4次，若使用自動洗板機(jī)，請按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡20秒的程序，可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板。
